解析羊elisa檢測試劑盒的詳細操作流程

發布時間：2019-09-18 點擊次數：2637次

　　羊elisa檢測試劑盒測定在臨床檢驗中的應用由于各種抗原成份，包括小分子的半抗原，均可用以制備特異性的抗血清或單克隆抗體，利用此抗體作為試劑就可檢測標本中相應的抗原，因此免疫測定的應用范圍極廣，在臨床檢驗中可用于測定：

　　1、體液中的各種蛋白質，包括含量極少的蛋白質如甲胎蛋白等。

　　2、激素，包括小分子量的甾體激素等。

　　3、抗生素和藥物。

　　4、病原體抗原，HBsAg、HBeAg等。

　　5、另外，也可利用純化的抗原檢測標本中的抗體，例如抗-HBs等。

　　羊elisa檢測試劑盒的優勢特點：

　　1、*試劑：性、靈敏性、特異性。

　　2、規范包被操作：吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高。

　　3、先進的優化方案：回收利用率高、可靠性強。

　　4、適用范圍：適用于體液、組織勻漿，細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。

　　5、可檢測指標齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等。

　　6、節省實驗經費。

　　羊elisa檢測試劑盒的操作流程如下：

　　1、待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。

　　2、酶標板置4℃，包被過夜。

　　3、洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍，之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。

　　4、陰性對照孔每孔加入PBS50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

　　5、酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。

　　6、洗板，同（4）。

　　7、每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液100μl。

　　8、酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。

　　9、洗板，同（4）。

　　10、每孔加TMB顯色液100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。

　　11、每孔加100μl2mol/LH2SO4終止反應。

　　12、分別測450nm吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

　　13、數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

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