人ELISA檢測試劑盒標準品的稀釋與加樣

發布時間：2018-08-15 點擊次數：2791次

　　人ELISA檢測試劑盒實驗操作時需注意事項：

　　1.標準品的稀釋與加樣

　　2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品*終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

　　3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

　　4.配液：將30（48t的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48t的20倍）倍稀釋后備用。

　　5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

　　6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

　　7.溫育：操作同3。

　　8.洗滌：操作同5。

　　9.顯色：每孔先加入顯色劑a50μl，再加入顯色劑b50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

　　10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

　　11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（od值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

　　人ELISA檢測試劑盒范圍：科研實驗等領域科學研究，不得用于臨床診斷。

　　人ELISA檢測試劑盒特點：敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存，操作簡便。

　　人ELISA檢測試劑盒用途：用于測定血清，血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。

　　人ELISA檢測試劑盒檢測種屬：大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬。

　　樣本類型：適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞上清、組織勻漿等樣本。

　　ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術要求，在檢測過程中除正常反應外，有時常見到一些錯誤的結果。